煙草在線據(jù)云南煙葉信息網(wǎng)站報(bào)道　　2015年第6期《湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》刊載的“云產(chǎn)品牌卷煙主體煙葉原料的復(fù)烤煙指紋圖譜的構(gòu)建”一文稱，利用ISSR引物能夠區(qū)分復(fù)烤煙品種，比照DNA指紋圖譜精準(zhǔn)鑒別復(fù)烤煙品種純度。

　　DNA指紋圖譜是品質(zhì)混雜的檢測(cè)工具，DNA指紋具有高度的個(gè)體特異性，分辨率高、穩(wěn)定可靠，能夠準(zhǔn)確地鑒定出生物個(gè)體和群體之間的差異，甚至可以鑒別出一些基因組中的微小變異，因而是一種理想的品種純度和真實(shí)性檢測(cè)技術(shù)。

　　該文用紅花大金元、云87、NC297、NC102、K326復(fù)烤煙品種進(jìn)行ISSR分析，發(fā)現(xiàn)利用826、836、841、847、856 ISSR引物能夠區(qū)分這5個(gè)復(fù)烤煙品種。在此基礎(chǔ)上，分別利用826和856引物構(gòu)建了5個(gè)復(fù)烤煙的DNA指紋圖譜，引物826在250-1000bp共讀得6個(gè)水平的PCR條帶，引物856在750-2000bp共讀得5個(gè)水平的PCR條帶。引物826在退火溫度為58℃時(shí)的指紋圖譜為：紅花大金元001011，云87100001，NC297011001，NC102001110，K326001001。引物856在退火溫度為58℃時(shí)的指紋圖譜為：紅花大金元11000，云8700100，NC29700011，NC10200000，K32600001。上述指紋圖譜可以作為5個(gè)復(fù)烤煙的標(biāo)準(zhǔn)譜帶，可作為復(fù)烤煙品種的鑒定依據(jù)。

　　該研究指出，在實(shí)際操作中，如果需要檢測(cè)它們是否存在品種混雜的問(wèn)題，可以通過(guò)分別提取復(fù)烤煙的DNA、用引物826　或856　在退火溫度為58℃進(jìn)行PCR　反應(yīng)、電泳檢測(cè)、照相、與本研究所得到的標(biāo)準(zhǔn)譜帶進(jìn)行比對(duì)即可。在其他復(fù)烤煙的試驗(yàn)過(guò)程中可以參考所篩選得到的引物和相應(yīng)的退火溫度進(jìn)行ISSR–PCR　反應(yīng)，進(jìn)而得到相應(yīng)品種的指紋圖譜，作為后續(xù)比對(duì)的標(biāo)準(zhǔn)譜帶。